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标准曲线的绘制

标准曲线的绘制方法
 
可以采用各种绘图软件来绘制ELISA标准曲线,下面以“Curve  Expert1.4”软件为例,绘制ELISA标准曲线的方法如下;
1.启动“Curve  Expert”
(点击下载Curve Expert1.3.zip 或下载升级版Curve Expert1.4.zip)
2.X轴输入标准品的OD值,Y轴输入所对应的浓度值,如图:

 
3.单击[运行]  按钮,出现如下对话框


4.单击[ok]按钮,出现如下两个对话框,关闭下面一个对话框
 


5. 在对话框的右上角出现一些曲线的名称,从“1”开始依次点击曲线名称,在右下角会出现相应拟合的曲线。
 
 
6. 根据拟合的曲线选取ELISA拟合度最佳的曲线双击,出现如下对话框:
注意:选择系数(即“r”值)最好的曲线方程来进行运算。在下面的对话框
右上角有“r”值 ,当“r”值越接近1拟合度越好



7.按[Ctrl]键+[L]键,出现如下对话框:


8.输入标准的OD值,单击[Calculate]按忸,即可得到待测蛋白的实际含量(标本稀释了N倍,运算出的数值应在乘以N)
 
9. 如想得到ELISA拟合曲线的方程,可在步骤6的对话框空白处右击,选择”Information”


10. 得到如下对话框:点击“Copy”
在你需要的位置粘贴即可得到如下数据:
Rational Function: y=(a+bx)/(1+cx+dx^2)
Coefficient Data:
a =   -21.531017
b =  212.05019
c =  -0.24054479
d =  0.018060778