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杆状病毒-昆虫细胞表达与纯化

杆状病毒表达系统(BEVS)属于真核表达系统,安全性高,由于有较大的基因组所以能够容纳较大的外源基因,得到的重组病毒易于筛选,并且具有完备的翻译后加工修饰系统和高效表达外源基因的能力。该系统由转移载体、杆状病毒载体和宿主细胞组成。该系统采用一个或多个杆状病毒的超强启动子,将外源目的基因插入到启动子后,获得重组病毒,这种重组病毒在昆虫细胞复制的同时,使外源基因得到高效表达。

杆状病毒表达系统与其他表达系统相比,具有以下的优势:

(1)安全性:杆状病毒具有严格的种属特异性,不感染脊椎动物和植物,相对于其他病毒载体,如痘病毒、腺病 毒载体等,有较高的安全性。
(2)易于扩增:杆状病毒可以大规模生产具有生物学活性的重组蛋白产品。
(3)外源基因表达效率高:与其他真核细胞表达系统相比,杆状病毒系统可以从受感染的晚期细胞中高效地表达外源蛋白。
(4)表达产物具有较高活性:杆状病毒将会在昆虫宿主细胞中大量扩增,而且产生的重组蛋白会进行类似哺乳动物细胞中的翻译后修饰,表达产物具有很强的生物活性。
昆虫细胞表达系统
服务项目 特点优势
重组供体质粒构建

利用交配辅助遗传整合克隆(MAGIC)系统,只需要简单的细菌混合,就可以快速构建重组杆状病毒载体,能够大大的节约时间,精力和花费; 
续订蛋白可享受3-5折优惠; 
可提供详细表达纯化条件,实验数据以及高滴度的病毒毒株

重组杆状病毒载体构建
表达条件优化
蛋白表达与纯化
昆虫细胞蛋白表达套餐
实验项目 实验流程 交付内容 时间
1.获得重组供体质粒
●基因的获得 核酸电泳图片 2周
●PCR扩增产物酶切连接到本公司改造过的pFastBac载体 
●转化E.coliDH10β
●获得测序正确的重组质粒
2.扩大化培养

●构建重组杆状病毒载体 
●重组杆状病毒质粒转染昆虫细胞 
●获得高滴度的病毒贮液

含有重组杆状病毒载体的质粒电泳图片 
高滴度的病毒贮液

3-4周
3.优化表达

●高滴度的病毒贮液再次感染昆虫细胞 
●表达产物SDS-PAGE电泳及western blot检测

SDS-PAGE电泳图及western blot印迹 1.5周
4.蛋白表达及纯化 ●纯化产物SDS-PAGE及western blot 1L上清的纯化产 1-2周

邮箱:tech@cusabio.com

电话:+86-27-87582341

传真:+86-27-87196150

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